Pipety jsou laboratorní zařízení používaná k měření a přenosu velmi malých objemů kapalin. Přesnost měření pipet je velmi důležitá, protože rozdíly v objemu, který pipeta klesla, mohou ovlivnit experimentální výsledky. Aby byla zajištěna přesnost, je důležité každých několik měsíců zkontrolovat kalibraci pipety. Proces kalibrace je užitečný pro kontrolu, zda z tohoto zařízení kape kapalina ve správném objemu, aby bylo možné v případě potřeby provést opravy.
Krok
Část 1 ze 2: Kontrola kalibrace
Krok 1. Shromážděte potřebné materiály
Chcete -li zkontrolovat kalibraci pipety, potřebujete pipetu, špičky pipety, destilovanou vodu, kádinku, teploměr, váhu a odměrku. Váha musí být v mikrogramové stupnici pro kalibraci mikropipety s maximální hodnotou 1 l.
- Nebudete potřebovat více než 5 ml vody. Naplňte kádinku vodou.
- Ujistěte se, že je špička pipety správná a dobře zapadá do pipety.
Krok 2. Změřte teplotu destilované vody
Vložte teploměr do vody a nechte jej alespoň minutu odležet. Pokud se červená čára teploměru stále pohybuje, počkejte další minutu. Po jedné minutě zaznamenejte teplotu. Vezměte teploměr a osušte ho, až budete hotovi.
Je důležité znát teplotu vody, protože bude použita pro výpočty prováděné ke kontrole kalibrace
Krok 3. Umístěte misku váhy na váhu a váhu vynulujte
V ideálním případě má použitá váha dveře a izolovaný prostor uvnitř. Umístěte odměrku do váhy a zavřete dvířka. Pokud vaše váha nemá skříňku a dveře, položte na váhu misku na vážení. Stiskněte tlačítko „Zero“nebo „Tare“a počkejte, až váha ukáže nulu.
Nulování váhy snižuje hmotnost plastového kelímku a umožňuje vážit pouze hmotnost látky umístěné v šálku
Krok 4. Připravte pipetu ke kalibraci
Před spuštěním pipetu otřete ethanolem a ujistěte se, že špička pipety nic neucpává. Připojte správný hrot pipety ke špičce pipety a určete testovaný objem.
Při kalibraci vyzkoušejte nejmenší a největší objemy, které lze z pipety vyjmout
Krok 5. Před kalibrací omyjte špičku pipety
Stiskněte tlačítko k prvnímu limitu a ponořte špičku pipety do destilované vody do hloubky přibližně 2 mm. Uvolněním tlačítka absorbujete část tekutiny a poté kapalinu znovu uvolníte stisknutím tlačítka. Tento krok opakujte třikrát, aby se špičky kapátka před použitím umyly.
Stisknutím tlačítka do druhého limitu odstraníte zbývající kapalinu na špičce pipety a poté pipetu vyjmete z vody
Krok 6. Nasajte kalibrační objem
S hrotem pipety umístěným mimo destilovanou vodu stiskněte tlačítko k prvnímu limitu. Ponořte špičku pipety 2 mm hluboko do destilované vody a uvolněním tlačítka nasajte kapalinu do špičky pipety. Počkejte asi 1 sekundu, než vyjmete špičku kapátka z vody.
Během aspirace se ujistěte, že je špička pipety zcela ponořena. Ve špičce kapátka by neměly být žádné bubliny nebo by výsledek mohl být špatný
Krok 7. Nalijte kapalinu do vážicí misky na váze
Umístěte špičku pipety na dno odměrky a poté stiskněte tlačítko pipety k prvnímu limitu. Přesuňte se do jiného bodu, kousek od vody, poté stiskněte tlačítko na druhou hranici. Držte tlačítko stisknuté a zvedněte špičku pipety z odměrky.
Ponechte špičku připojenou k pipetě, protože ji budete znovu používat pro některé další kalibrační testy
Krok 8. Zaznamenejte hmotnost uvedenou na váze
Pokud používáte dveřní váhu, zavřete dveře váhy. Počkejte, až se čísla již nezmění. Zapište si do sešitu.
Je důležité počkat, než se čísla na stupnici znovu nezmění, než je zapíšete. Pokud nebudete čekat, poznámky se pokazí
Krok 9. Opakujte tento proces, abyste provedli čtení alespoň 10krát
Váhu znovu vynulujte, před použitím špičky pipety omyjte, nasajte stejný objem tekutiny, odeberte objem a poté zaznamenejte hmotnost. Zaznamenejte hmotnost destilované vody pro stejný objem a poté průměrujte všechny své poznámky.
Pokud je každý svazek testován vícekrát, můžete tento postup opakovat pro různé svazky
Část 2 ze 2: Výpočet výsledku kalibrace
Krok 1. Definujte vzorec pro vypočítaný objem
Vzorec pro výpočet objemu kapaliny vyvržené pipetou je V = w * Z, w je hmotnost vody, Z je převodní faktor založený na hustotě vody, zatímco V je objem množství vody odstraněny.
- Proměnnou Z lze získat výpočtem hustoty vody pomocí teploty zaznamenané na začátku experimentu.
- Například: Pokud je teplota vody 23 ° C, je hodnota Z 1,0035 g/mg.
Krok 2. Vypočítejte celkový průměr kalibrací pipet
Objem vody uvolněné pipetou byl odvážen nejméně desetkrát. Chcete -li průměrovat všechny tyto hodnoty, sečtěte je všechny dohromady a vydělte 10. Pokud jste provedli více či méně procesu, sečtěte celkové výsledky a poté vydělte počtem provedených pokusů.
- Například: Hmotnost vody z 10 experimentů, které jste provedli s 10 µL pipetou, je následující: 9, 89, 10, 01, 10, 02, 9, 99, 9, 95, 10, 04, 9, 96, 10, 01, 9, 99 a 9, 98.
- Průměr je: (9, 89 + 10, 01 + 10, 02 + 9, 99 + 9, 95+ 10, 04 + 9, 96 + 10, 01 + 9, 99 + 9, 98)/10 = 99, 84/10 = 9 984
Krok 3. Zapojte proměnné do rovnice a vyřešte
Jakmile pro každou proměnnou určíte správné číslo, vložte jej do vzorce a dokončete vypočítaný objem. Chcete -li tuto rovnici vyřešit, jednoduše vynásobte průměrnou hmotnost všech pokusů hodnotou Z.
Například: V = w * Z = 9,984 * 1,0035 = 10, 019
Krok 4. Vypočítejte přesnost pipety
Použijte rovnici A = 100 x Vprům/PROTI0 pro výpočet přesnosti pipety. A označuje přesnost pipety, Vprům je vypočtený průměrný objem a V0 je hodnota nastavená na pipetě. Hodnota přesnosti by měla být mezi 99-101%.
- Pokud je pipeta správně kalibrována, měla by být vypočítaná hodnota velmi blízká skutečné hodnotě nastavené na pipetě.
- Například: A = 100 x Vprům/PROTI0 = 100 x 10, 01/10/10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
- Tato pipeta je správně kalibrována.
Krok 5. V případě potřeby odešlete pipetu ke kalibraci
Pokud vaše pipeta neprojde kalibračním testem, hned ji nepoužívejte k experimentování. Pipety jsou velmi křehké a drahé laboratorní vybavení. Kalibraci nemůžete opravit sami, pipetu je třeba zaslat na opravu. Alternativně přijde do vaší laboratoře několik společností a zkalibruje pipetu na místě.
