V chemii je ředění proces snižování koncentrace látky v roztoku. Řetězové ředění je opakované ředění roztoku za účelem rychlého zvýšení ředicího faktoru. Tento postup se obvykle provádí v experimentech, které vyžadují velmi zředěná řešení s vysokou přesností. Například experimenty zahrnující koncentrační křivky v logaritmickém měřítku nebo experimenty ke stanovení hustoty bakterií. Ředění řetězců jsou široce používána ve vědeckých experimentech, jako je biochemie, mikrobiologie, farmakologie a fyzika.
Krok
Metoda 1 ze 2: Provedení základního ředění
Krok 1. Určete vhodný roztok ředidla
Je velmi důležité určit kapalinu, která má být použita k ředění. Mnoho roztoků je rozpustných v destilované vodě, ale není tomu tak vždy. Pokud ředíte bakterie nebo jiné buňky, proveďte to na kultivačním médiu. Vybraná kapalina bude použita pro všechna ředění řetězců.
Pokud máte pochybnosti o tom, které ředidlo použít, vyhledejte pomoc nebo se podívejte online. Podívejte se na příklady od ostatních, kteří provedli podobná ředění řetězce
Krok 2. Připravte si několik zkumavek obsahujících 9 ml ředidla
Pro prázdná ředění se používají zkumavky. Nejprve vložte nezředěný vzorek do první zkumavky a poté proveďte ředění za sebou do dalších zkumavek.
- Označte všechny použité zkumavky před zahájením ředění, abyste se po spuštění experimentu nenechali zmást.
- Každá zkumavka bude naplněna 10 ředěními, počínaje zkumavkou, jejíž látka nebyla zředěna. Ředění v první zkumavce je 1:10, následuje 1: 100 ve druhé zkumavce, 1: 1000 pro třetí atd. Předem určete množství ředění, které je třeba provést, abyste nepromarnili roztok ředidla.
Krok 3. Připravte si zkumavku obsahující alespoň 2 ml neředěného roztoku
Minimální množství roztoku, které má být zředěno k provedení tohoto ředění řetězce, je 1 ml. Pokud použijete pouze 1 ml, nezůstane nezředěný roztok. Označte BLM pro neředěná řešení.
Před jakýmkoli ředěním roztok důkladně promíchejte
Krok 4. Proveďte první ředění
Pipetou odeberte 1 ml neředěného roztoku ze zkumavky BLM a vložte jej do zkumavky označené 1:10 obsahující 9 ml ředidla, poté důkladně promíchejte. Nyní je 1 ml neředěného roztoku v 9 ml ředidla. Roztok byl tedy zředěn faktorem ředění 10.
Krok 5. Proveďte druhé ředění
Pro druhé ředění odeberte 1 ml roztoku zkumavky 1:10 a poté jej vložte do zkumavky 1: 100, která také obsahuje 9 ml ředidla. Před přidáním do další zkumavky se ujistěte, že je roztok ve zkumavce 1:10 zcela promíchán. Opět se ujistěte, že je ředění ve zkumavce 1: 100 zcela promícháno. Roztok zkumavky 1:10 byl zředěn 10krát ve zkumavce 1: 100.
Krok 6. Pokračujte v tomto postupu, abyste provedli delší ředění řetězce
Tento proces lze opakovat tolikrát, kolikrát je to nutné k dosažení požadované koncentrace roztoku. V experimentech s použitím koncentračních křivek můžete provést řetězová ředění za vzniku řady roztoků s ředěním 1, 1:10, 1: 100, 1: 1 000.
Metoda 2 ze 2: Výpočet faktoru ředění a konečné koncentrace
Krok 1. Vypočítejte poměr posledního ředění v ředění řetězce
Celkový poměr ředění lze určit vynásobením faktoru ředění z každého kroku do posledního kroku. Matematická ilustrace je se vzorcem Dt = D1 xD2 xD3 x… x D , Dt je součinitel celkového ředění a D je poměr ředidla.
- Řekněme například, že provedete ředění 1:10 4krát. Zapojte faktor ředidla do vzorce: Dt = 10 x 10 x 10 x 10 = 10 000
- Faktor ředidla ve čtvrté zkumavce v tomto řetězcovém ředění je 1: 10 000. Koncentrace látky po naředění je 10 000krát nižší než před naředěním.
Krok 2. Stanovte koncentraci roztoku po zředění
Chcete -li určit konečnou koncentraci roztoku po zředění řetězce, musíte znát jeho počáteční koncentraci. Vzorec je Ckonec = C.začátek/DCkonec je konečná koncentrace zředěného roztoku, Czačátek je počáteční koncentrace původního roztoku a D je předem určený poměr ředění.
- Například: Pokud začnete s roztokem buněk, jehož koncentrace je 1 000 000 buněk na ml a poměr ředění je 1 000, jaká je konečná koncentrace naředěného vzorku?
-
Pomocí vzorce:
- Ckonec = C.začátek/D
- Ckonec = 1.000.000/1.000
- Ckonec = 1000 buněk na ml.
Krok 3. Ujistěte se, že všechny jednotky jsou stejné
Při provádění jakéhokoli výpočtu se ujistěte, že jednotky jsou na konci výpočtu vždy stejné. Pokud jsou počáteční jednotky buňky na ml, ujistěte se, že jednotky zůstanou na konci výpočtu stejné. Pokud je počáteční koncentrace částic na milion (bpd), pak konečná koncentrace musí být také v jednotkách bpj.
